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2010-03-21 RACE(Rapid Amplification of mRNA Ends by PCR)技术扩增构建全长...
cDNA链的连接、包装及转染,是一种经典技术。但由于1,在以mRNA模板进行逆转录过程中,逆转录酶在从模板mRNA中逆转录酶脱落,只能得到部分拷贝的cDNA产物;2,mRNA极易降解,而在进行逆转录过程中,这些5'末端部分被降解的mRNA仍可为模板合成cDNA,因此用此方法构建的文库在多数情况下其5'末端为部分缺失的cDNA。
2010-03-21 cDNA链的连接、包装及转染
C文库构建的简单流程为: RNA-mRNA-cDNA单一链的合成-cDNA单二链的合成-加接头-与载体连接-体外包装-转染-筛选文库
2010-03-21 cDNA文库构建技术-cDNA链的反转合成
构建cDNA文库是一种获得目标基因并进一步进行基因重组,基因克隆的重要方法,而在该文库构建中有mRNA 逆转录出cDNA是一步极为关键的操作。mRNA的逆转录主要由MMLV、AMV两种逆转录酶催化合成cDNA,在这个逆转录过程中,模板mRAN及逆转录酶是两个最重要的影响因素。
2010-03-05 基因组DNA文库构建必备实验技巧
一、分离基因组DNA(gDNA) 二、处理基因组DNA 三、载体的选择 四、将基因组DNA片段连接入载体 五、将重组载体转入宿主细胞 六、文库克隆数的确定
2010-03-05 再扩增VH基因文库添加3‘限制性位点并克隆创建VH基因节段文库
再扩增VH基因文库添加3‘限制性位点并克隆创建VH基因节段文库
2010-03-05 Screening lambda cDNA or genomic libraries
Screening lambda cDNA genomic libraries
2010-03-05 Cosmid Library
Cosmid Library
2010-03-05 SCREENING A LAMBDA BACTERIOPHAGE GENOMIC LIBRARY WITH A DNA PROBE
SCREENING A LAMBDA BACTERIOPHAGE GENOMIC LIBRARY WITH A DNA PROBE
2010-03-05 Preparation of Nested Deletions
Preparation of Nested Deletions
2010-03-05 Growing up of BAC clones
Growing up of BAC clones
2010-03-05 Shotgun Library
Shotgun Library
2010-03-05 Yeast Two-Hybrid Screen with Library and Bait
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2010-03-05 Amplifying a large phage-display library without losing diversity
Amplifying a large phage-display library without losing diversity
2010-03-05 Amplifying a Library
Amplifying a Library
2010-03-05 VHCDR3基因文库与VL基因的扩增
VHCDR3基因文库与VL基因的扩增
2010-03-05 PCR剪接VHCDR3基因文库和VL基因构建scFv基因文库
PCR剪接VHCDR3基因文库和VL基因构建scFv基因文库
2010-03-05 构建人VH基因节段文库
构建人VH基因节段文库

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