rss信息聚合 生物秀旗下生物秀 | 易生物 | 生物秀论坛 | 生物部落 | 生物百科 | 生物秀知道 | 易生物人才网
2011-07-17 PCR操作时应注意的事项
PCR检测微量感染因子时,容易因为污染的而导致各种问题,因此,进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。
2011-07-17 分析PCR扩增的重要标准
什么是PCR实验的灵敏度? 灵敏度指的是PCR扩增反应能够检测到目的基因的最小值。研究结果表明,影 响PCR扩增效率的因素,如模板的复杂程度与完整性、引物的纯度及其与模板的结合效率、反应温度、DNA聚合酶的热稳定性
2010-05-26 PCR实用技巧
增加PCR的特异性:
2010-03-25 PCR(多聚酶链反应)实验原理、方法步骤和注意事项
PCR扩增产物的分析法:PCR扩增DNA片段只是一个重要手段,扩增片段的检测和分析才是目的,根据研究对象和目的的不同而采用不同的分析法。琼脂糖凝胶电泳可鉴定扩增产物的大小;点杂交技术除可鉴定扩增产物外,还有助于产物的分型;Southern杂交分析可从非特异扩增产物中鉴定出特异产物的大小,增加检测的特异性与敏感性;最近发展的一系列产物分析法(PCR-ELISA、PCR-EIA、PCR-OLA等)均有助于PCR产物的精确分析。
2010-03-25 多聚酶链式反应技术(PCR技术)
多聚酶链式反应即PCR(polymerase chain reaction)技术,应用这一技术可以将微量目的基因(DNA片段)扩增一百万倍以上。一、PCR技术的工作原理 二、PCR引物的设计 三、PCR的基本操作步骤及条件优化 四、PCR技术的主要用途 五、几种重要的衍生PCR技术
2010-03-24 聚合酶链式反应及其产物分析
聚合酶链式反应及其产物分析
2010-03-23 PCR技术原理、实验步骤和应用
PCR技术,即聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年获诺贝尔化学奖)建立的。这项技术可在试管内的经数小时反应就将特定的DNA片段扩增数百万倍,这种迅速获取大量单一核酸片段的技术在分子生物学研究中具有举足轻重的意义,极大地推动了生命科学的研究进展。
2010-03-23 PCR技术导论、实验条件和试验程序
PCR技术是一种模拟自然DNA复制过程的体外酶促合成特异性核酸片段技术(亦称无细胞分子克隆技术)。它以待扩增的两条DNA链为模板,由一对人工合成的寡核苷酸作为介导,通过DNA聚合酶促反应,在体外进行特异DNA序列扩增。
2010-03-23 PCR扩增分离目的DNA片段实验原理、材料和步骤
PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应是1986 年由Kallis Mullis 发现。PCR技术已成为方法学上的一次革命,它必将大大推动分子生物学各学科的研究发展。PCR 技术具有操作简便、省时、灵敏度高特异性强和对原始材料质量要求低等优点,但由于所用的TaqDNA 聚合酶缺乏5'—3'核酶外切酶活性,不能纠正反应中发生的错误核苷酸掺入,估计每9000个核苷酸会导致一个掺入错误,不过Innis M·A 发现,错误掺入的碱基有终止链延伸的作用倾向,使得错误不会扩大。
2010-03-23 PCR产物的直接纯化原理、材料与方法
PCR产物一般都含有过量的引物、Taq DNA酶及dNTP,这些成分的存在将直接影响到后续的酶切、双脱氧PCR测序反应等过程,因此有必要除去。目前核酸纯化的方法有很多,商用化试剂盒的出现使得DNA的纯化过程变得更加简便快捷。
2010-03-22 基因扩增检验标本的处理保存及核酸提取方法
应用聚合酶链反应(PCR)技术测定临床标本中的病原体核酸成分,是一种高度敏感,且最为直接的检测手段。由于临床标本中含有蛋白质、脂类等物质,可干扰PCR反应,故在做PCR反应前必须进行核酸提取。 经典的核酸提取方法通常是加去污剂(SDS等)裂解细胞,经蛋白酶处理、有机溶剂提取及乙醇沉淀等步骤。
2010-03-22 PCR基因扩增及扩增产物的回收实验原理及过程
为了获得大量的AKP基因,我们需要将目的基因通过PCR扩增基因剂量,方便下一步实验作基因重组。 我们需要注意PCR产物的准确性和产率。特别注意引物、复性温度、TaqE对准确性的影响和延伸时间(1000bp/min)、Mg2+浓度、循环数(小于等于30)对产率的影响。
2010-03-22 PCR基因扩增实验原理、仪器试剂和操作步骤
PCR(PolymeraseChainReaction)-聚合酶链式反应,可以选择性扩增一段DNA序列。其基本步骤是,首先将待扩增的模板DNA变性使之成为单链,DNA样品中,特异性的引物能够与其互补的序列杂交,在dNTPs和Taq酶存在时,就可以合成模板 DNA的互补链,反应完成后,将反应混合物加热使DNA双链变性,温度下降后,过量的引物又可以开始第二轮的合成反应。
2010-03-22 PCR反应条件的选择及优化
聚合酶链反应必须具备下述基本条件:①模板核酸(DNA或RNA),②人工合成的寡核苷酸引物,③合适的缓冲体系,④镁离子,⑤三磷酸脱氧核苷酸,⑥耐热DNA聚合酶,RNA反转录酶及RNA酶抑制剂(RNasin),⑦ 温度循环参数(变性、复性和延伸的温度与时间及循环次数)。
2010-03-22 Principle of the PCR
Principle of the PCR
2010-03-22 PCR反应条件的三要素(温度、时间和循环次数)
PCR反应条件的三要素(温度、时间和循环次数)
2010-03-22 PCR操作范例和PCR反应系统的组成
一、PCR操作范例 二、PCR反应系统的组成 (一)PCR缓冲液(PCr Buffer) (二)四种脱氧三磷酸核苷酸(4×dNTPs) (三)引物的量 (四)Taq DNA聚合酶的量 (五)模板 (六)石蜡油 三、电泳分析
2010-03-22 聚合酶链反应[PCR]实验原理和操作步骤
聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)即PCR技术是美国Cetus公司人类遗传研究所的科学家K.B.Mullis于1983年发明的一种体外扩增特定基因或DNA序列的方法。PCR具有很高的特异性、灵敏度,在分子生物学、基因工程研究、某些疾病的诊断以及临床标本中病原体检测等方面具有极为重要的应用价值。
2010-03-22 PCR反应体系(缓冲液、脱氧核苷三磷酸、引物、模板与DNA聚合酶)
1.缓冲液 2.脱氧核苷三磷酸(dNTP) 3.引物 4.模板 5.DNA 聚合酶
2010-03-22 PCR反应程序
PCR反应程序 1.常规程序 2.复性(退火)和延伸温度 3.反应时间 4.循环次数 5.PCR 反应液的配制

总数:148 首页上一页下一页尾页 页次:1/8

易生物实验技术频道 - 生物实验技术资料库!
网址:http://shiyan.ebioe.com

推荐生物实验图片文章

相关产品

生物实验热点文章

 
*×
易生物VIP企业推荐