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2011-07-23 血红蛋白电泳(hemoglobin electrophoresis)(HbA2定量)
实验原理 血红蛋白电泳(hemoglobin electrophoresis)目的是检出和确认各种正常和异常的血红蛋白。 根据不同的血红蛋白带有不同的电荷,等电点不同,在一定的pH缓冲液中,血红蛋白的等电点小于缓冲液的pH时
2010-04-10 电泳技术——生物化学实验常用技术
带电颗粒在电场作用下向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳。如带正电荷的粒子向负极移动,带负电荷的粒子向正极移动。电泳技术是生物化学与分子生物学中的重要研究方法之一,利用电泳技术可分离许多生物物质,包括氨基酸、多肽、蛋白质、脂类、核苷、核苷酸及核酸等,并可用于分析物质的纯度和分子量的测定等。
2010-04-10 血清蛋白琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)
血清蛋白琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)
2010-04-08 蛋白质相互作用(protein interaction)实验方法
免疫共沉淀和亲和层析共分离:免疫共沉淀是证明蛋白质-蛋白质相互作用的最直接最经典和最有效的方法,如蛋白A能与B相互作用结合成异源二聚体,无论用抗A或抗B的抗体或与A或 B的亲和物偶联的agarose小珠都能把A和B沉淀下来;酵母双杂交系统;Far western则是用标记的蛋白(125I或荧光)去probe与之相互作用的蛋白,或再用抗这种蛋白的抗体显示这种蛋白的结合位置,用于研究蛋白质的相互作用。
2010-04-05 蛋白质两性性质及等电点的测定
蛋白质是两性电解质。蛋白质分子中可以解离的基团除N端α―氨基与C端α―羧基外,还有肽链上某些氨基酸残基的侧链基团,如酚基、巯基、胍基、咪唑基等基团,它们都能解离为带电基团。
2010-04-04 包涵体(inclusion body)表达的蛋白的复性
蛋白的复性是一个世界性的难题,没有通用的方法,甚至没有靠得住的规律,只能试。包涵体:包涵体是指细菌表达的蛋白在细胞内凝集,形成无活性的固体颗粒。
2010-04-04 尿素对蛋白质的变性作用(denaturation of protein)
天然蛋自质分子中的肽链以一定的方式盘绕曲折,形成特定的构象。这种构象的维持,主要依赖于蛋白质分子中的氢键。尿素能破坏氢键,导致蛋白质分子结构松弛,使蛋白质变性,变性后,蛋白质的肽链就伸展开来,从而使原来包藏在分子内部的-SH 暴露,能与巯基试剂作用,在一定范围内,暴露的-SH 随着变性程度的加深而增加,因此测定-SH 的增加,可衡量蛋自质的变性程度。在碱性条件下,-SH 可被亚硝基铁氰化钠N[Fe(NO)(CN)5]2-氧化成-S-S(二硫键),氧化剂的铁由高价还原成低价,其配合物呈红色。
2010-04-04 蛋白质序列分析和结构预测
蛋白质序列分析和结构预测
2010-04-04 绿色荧光蛋白(GFP,Green-Fluorescent Protein) 在抗肿瘤药物研究...
GFP在肿瘤研究中的应用 GFP在肿瘤发病机制研究中的应用 GFP在肿瘤发生发展研究中的应用 GFP 在检测肿瘤血管形成方面的应用 FP在抗肿瘤药物筛选中的应用
2010-03-29 胶体金标记蛋白A技术(Protein A-gold technique, PAg法)
PAg 复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用,蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A的活性,又能保持高度的稳定性,PAg复合物分子最小易于穿透组织。PAg复合物的原液在4℃可保存达一年之久。电镜水平的PAg染色法 PAg法在电镜技术的应用原则是二步标记法,可用于包埋前和包埋后染色。
2010-03-29 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳原理和操作
血清脂蛋白经饱和乙酰苏丹黑B染色后,以琼脂糖凝胶为载体,在pH8.6巴比妥缓冲液中电泳分离,各种脂蛋白将分成不同区带。
2010-03-24 蛋白质N端测序技术介绍
蛋白质N端测序技术
2010-03-07 多肽物质分离与分析方法研究进展
综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法, 主要包括高效液相色谱法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。
2010-03-07 多肽抗生素研究进展
摘要 多肽抗生素是生物界中广泛存在的一类生物活性小肽,一般具有抗细菌或真菌的作用,有些还具有抗原虫、病毒或癌细胞的功能。按照化学结构的不同,多肽抗生素可分为 5 类: ①具有螺旋结构的线性多肽; ②富含某种氨基
2010-03-05 关于研究蛋白质细胞定位的几种方法
研究蛋白的亚细胞定位可采取多种方法:免疫胶体金标记;免疫荧光;与gfp构建融合基因,用荧光显微镜观察;蔗糖密度梯度离心;多糖序列分析等。以下介绍免疫胶体金标记、免疫荧光、与gfp构建融合基因等常用方法。
2010-03-05 绿色荧光蛋白(GFP)标记亚细胞定位
利用绿色荧光蛋白(GFP)来示踪胞内蛋白的技术。利用GFP融合蛋白技术来进行活细胞定位研究是目前较为通行的一种方法,在光镜水平进行研究,不需要制样,没有非特异性标记的影响。并且GFP的分子量为27kD,经激光扫描共聚集显微镜激光照射后,可产生一种绿色荧光,从而对蛋白质进行精确定位。
2010-03-04 血清蛋白(serum protein)琼脂糖凝胶电泳
血清中脂类物质与血清载脂蛋白结合成水溶性的脂蛋白(lipoprotein)形式存在。各种脂蛋白中所含载脂蛋白的种类及数量不同,各种脂蛋白颗粒大小也相差很大,因此,以琼脂糖凝胶为支持物,在电场中可使各种脂蛋白颗粒分离开来。

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