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2010-04-29 动物组织/细胞总RNA的制备及检测
Trizol是一种新型的总RNA即用型制备试剂,适用于从各种组织或细胞中快速分离总RNA。Trizol 试剂是由苯酚和异硫氰酸胍配制而成的单相的快速抽提总RNA的试剂,在匀浆和裂解过程中,能在破碎细胞、降解细胞其它成分的同时保持RNA的完整性。在氯仿抽提、离心分离后,RNA处于水相中,将水相转管后用异丙醇沉淀RNA。
2010-04-22 哺乳动物组织样品RNA的抽提
哺乳动物组织样品RNA的抽提最基本的要素是防止RNA在抽提过程中降解,以及尽可能得到最高的RNA抽提效率。以下介绍我们实验室认为最符合以上两个要素的抽提方法。
2010-04-22 改良热硼酸盐法提取RNA
2010-04-22 酵母核糖核酸的分离及组分鉴定
酵母核酸中RNA含量较多。RNA可溶于碱性溶液,在 碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀, 由此即得到RNA的粗制品。核糖核酸含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸各组分。加硫酸煮沸可使其水解,从水解液中可以测出上述组分的存在。
2010-04-22 RNA Extraction Protocol(By Thomas Whisenant)
RNA Extraction Protocol(By Thomas Whisenant)
2010-04-22 啤酒酵母(S.cerevisiae)mRNA的提取
2010-04-21 避免RNA酶污染的方法
RNase酶非常稳定,是导致RNA降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活,但限制因素去除后又迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂不能使所有的RNase完全失活。为了获得高质量的真核细胞mRNA,必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。
2010-04-21 RNA制备的问题与解答
1、塑料制品、玻璃和金属物品的处理 2、RNase 是RNA制备的杀手 3、采用什么方式纯化总RNA? 4、什么时候需要分离mRNA? 5、如何判定分离的总RNA的纯度? 6、什么时候需要加入RNA-Carrier? 7、如何除去纯化的RNA中微量的基因组DNA? 8、纯化的RNA样品如何保存? 9、组织和细胞样品如何收集,保存? 10、如何估计RNA的产量?
2010-04-21 小麦黄化苗总mRNA的提取
RNA是一类极易降解的分子,要得到完整的RNA必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。本实验以小麦为材料,采用异硫氰酸胍—苯酚—氯仿抽提法或CTAB法提取总RNA。异硫氰酸胍是高浓度变性剂,可溶解蛋白质,破坏细胞结构,使蛋白质与核酸分离,失活RNA酶,所以RNA从细胞中释放出来时不被降解。
2010-04-21 从植物细胞和组织及丝状真菌中提取纯化总RNA
从植物细胞和组织及丝状真菌中提取纯化总RNA
2010-04-21 植物总RNA的提取规程
RNA的提取:破坏细胞膜—除去蛋白—除去DNA—除去盐离子。RNase是一类生物活性极其稳定的酶类,能耐高温、耐酸、耐碱,高压灭菌处理也不能使其完全失活。在提取RNA实验中,要尽量抑制RNase的活性。
2010-04-21 RNA提取与RT-PCR
1.RNA的提取 1.1 分离高质量RNA 1.2 RNA提取的最大影响因素-RNA酶 1.3 常用的RNA酶抑制剂 1.4 防止RNA酶污染的措施、RNA提取之前需要注意和准备的工作 1.5 RNA提取的一般步骤 1.6RNA抽提新方法 -TRIZOL法 2.RT-PCR 2.1 RT-PCR的原理 2.2 RT-PCR的步骤 2.4 引物退火温度 2.5 提高逆转录保温温度 2.6 促进逆转录的添加剂 2.7 RNaseH处理 2.8 小量RNA检测方法的提高 2.9 一步法同两步法RT-PCR的比较 2.10 增加RT-PCR特异性 2.11 提高逆转录保温温度 2.12 减少基因组DNA污染
2010-04-20 RNA提取心得(组织RNA提取和培养细胞的RNA提取)
一.组织RNA提取 二.培养细胞的RNA提取
2010-04-20 微量RNA的抽提RNeasy MinElute Spin Column
微量RNA的抽提RNeasy MinElute Spin Column
2010-04-20 RNA提取的操作步骤、注意事项和常见问题分析
RNA的提取
2010-04-20 细胞总RNA的提取操作步骤
细胞总RNA的提取操作步骤
2010-04-20 Cell Disruption: Getting the RNA Out
Cell Disruption: Getting the RNA Out
2010-04-20 病毒RNA提取实验方法
1,用异硫氰酸胍提取 2,用TRIzol LS提取 3,Trizol 法提病毒protocol
2010-04-20 植物组织RNA提取的难点及对策(The Difficulties in the Isolation...
从植物组织中提取RNA是进行植物分子生物学方面研究的必要前提。要进行Northern杂交分析,纯化mRNA以用于体外翻译或建立cDNA文库,RT-PCR及差示分析等分子生物学研究,都需要高质量的RNA。因此,从植物组织中提取纯度高、完整性好的RNA是顺利进行上述研究的关键所在。
2010-04-20 RNA的制备方法步骤
来源于任何细胞的RNA都可以通过反转录酶的作用拷贝成双链DNA并克隆化,获得相应的于特定细胞来源的cDNA文库。因此,RNA制备的意义有两个方面 * 获得特定细胞来源的cDNA文库,克隆目的基因 * 分析基因的表达,阐明基因调控的特性,了解从基因转录产生RNA的结构,数量,水平及合成的速率

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