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2010-04-19 mRNA 水平检测基因沉默
RNA 提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。在有EB 存在时,完整未降解的RNA制品电泳图谱应可清晰看到18S rRNA、28S rRNA 两条带,也应当能看到一条由tRNA、5.8S rRNA 和5S rRNA 组成的、较模糊迁移较快的条带,且28S rRNA 条带亮度应为18S rRNA的1.5-2 倍。
2010-04-19 miRNA海绵—长效抑制miRNA
随着研究的深入,已知miRNA的数量与日俱增,目前Sanger miRBase数据库中收录的人miRNA已达721条。不过,大部分miRNA的功能仍是未知数。在基因功能研究中,最有效的方法是阻止特定基因的功能,然后了解其后果。miRNA同样如此。
2010-04-19 Double-Stranded RNA Interference with Gene Expression: RNAi
A surprising discovery has recently revolutionized C. elegans "reverse genetics"-the process by which scientists begin with a known gene sequence and attempt to define its biological function by disrupting its activity in vivo.
2010-04-19 RNA干扰(RNA interference ,RNAi)的研究进展
RNA干扰(RNA interference ,RNAi) 现象是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制。将与靶基因的转录产物mRNA 存在同源互补序列的双链RNA(double strand RNA ,dsRNA) 导入细胞后,能特异性地降解该mRNA ,从而产生相应的功能表型缺失,这一过程属于转录后基因沉默机制( posttranscriptional gene siliencing , PTGS) 范畴。
2010-04-19 miRNA的功能分析策略
在发育或分化的不同阶段以及疾病模型中,利用miRNA特异的芯片能绘制出细胞和组织的miRNA表达谱,这能够揭示出参与了这些进程的特定miRNA。 miRNA的过表达和沉默,则是一种有力的方法来研究miRNA的功能。这些研究应当在细胞内或体内进行,并与表型和基因表达分析相结合。
2010-04-19 RNA干扰(RNAi)实验原理与方法
将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。 RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effector steps)。在RNAi效应阶段,siRNA双链结合一个核酶复合物从而形成所谓RNA诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex, RISC)。
2010-04-18 RNAi原理图解
Long double-stranded RNAs (dsRNAs; typically >200 nt) can be used to silence the expression of target genes in a variety of organisms and cell types (e.g., worms, fruit flies, and plants).
2010-04-18 siRNA设计指南
Using siRNA for gene silencing is a rapidly evolving tool in molecular biology. There are several methods for preparing siRNA, such as chemical synthesis, in vitro transcription, siRNA expression vectors, and PCR expression cassettes. Irrespective of which method one uses, the first step in designing a siRNA is to choose the siRNA target site.
2010-04-18 RNA干扰(RNA interference, RNAi)技术初探
RNA干扰(RNA interference, RNAi)是近年来发现的研究生物体基因表达、调控与功能的一项崭新技术,它利用了由小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)引起的生物细胞内同源基因的特异性沉默(silencing)现象,其本质是siRNA与对应的mRNA特异结合、降解,从而阻止mRNA的翻译。
2010-04-18 RNA干扰(RNA interference,RNAi)研究进展
RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是由双链RNA(double- strandedRNA,dsRNA)引发的转录后基因静默机制. RNAi是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制. 目前已成功用于基因功能和信号转导系统上下游分子相互关系的研究,有可能为肿瘤基因治疗提供新策略.
2010-04-18 RNA干扰技术研究前沿与应用领域
一.外源RNA诱导RNAi的应用 1. 基因功能研究 2. 基因治疗及药物筛选探索 二.内源RNAi机制及功能研究 1. 抗病毒功能 2.基因调控 3.染色质浓缩 4.转座子沉默 5.基因组重组
2010-04-18 RNAi技术在基因组学中的应用
Christophe Echeverri thinks big with siRNAs.
2010-04-18 RNA干扰(RNA interference)——有望用于治疗SARS的新技术
RNA干扰(RNA interference)是一种由双链RNA诱发的基因沉默(gene silencing)。在此过程中,与双链RNA有同源序列的信使RNA(mRNA)被降解,从而抑制了该基因的表达。RNA干扰技术在探查基因功能和治疗人类疾病方面有广阔的应用前景。国内已有研究机构将该技术用于SARS治疗的攻关研究。本文简要介绍RNA干扰的研究历史、作用机制和应用。
2010-04-18 反义技术——RNA干扰(RNA interference,RNAi)
最近由于RNA干扰(RNA interference,RNAi)的发现使反义领域的研究增多。这种自然发生的现象最早是在秀丽线虫中发现的(1),是序列特异性地使转录后的基因沉默的有力机制。由于最近两年在RNAi领域取得的进步,已经有许多这方面的综述发表(2-4)。
2010-04-18 RNAi(RNA干扰)的分子机制
通过生化和遗传学研究表明,RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effector steps)。在起始阶段,加入的小分子RNA被切割为21-23核苷酸长的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。在RNAi效应阶段,siRNA双链结合一个核酶复合物从而形成所谓RNA诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex, RISC)。
2010-04-18 siRNAs结合生物芯片的实验设计
Ambion and Applied Biosystems have joined forces to provide a complete convenient, solution for performing gene silencing experiments and validating the results by real-time RT-PCR. Ambion's Silencer™ Validated and Silencer Pre-designed siRNAs eliminate the guesswork--and the tedious labwork--associated with siRNA design and testing.
2010-04-18 RNAi在干细胞研究中的应用及其进展
在各类生物中,双链 RNA(dsRNA)诱导产生特异性基因沉默的机制,被称为RNA干扰(RNAi)。dsRNA干扰技术可通过降解靶基因的mRNA进行基因干涉,是研究多种生物基因功能的有效手段。本文从RNAi相关的Dicer、Agronaute基因家族等来认识其基因沉默必需基因与干细胞功能特性的关系,并综述利用RNAi干扰技术在干细胞研究与应用的进展。
2010-04-18 RNAi——双链RNA引起的基因敲除
一. RNAi的机理 目前RNAi的作用机理主要是在线虫,果蝇,斑马鱼等生物体内阐明的。 二. 哺乳动物细胞中的RNAi 在小鼠的胚胎细胞中也存在RNAi,将727个碱基对的双链RNA转入小鼠的畸胎瘤细胞,诱发了细胞内的RNAi机制,并抑制了报告基因的表达[6]。 三. 双链RNA的构建 双链RNA可先在体外构建好,然后转染细胞。在体外构建双链RNA时,分别在体外转录出正义和反义 RNA,再将两者退火,形成双链RNA。 四. RNAi的应用
2010-04-18 RNA干涉(RNA Interference,RNAi)
基因沉默(gene silencing)是生物体内特定基因由于种种原因不表达的遗传现象。一方面,基因沉默是生物遗传操作创造新的遗传修饰生物(genetically modified organisms)的障碍,另一方面,它又是植物抵抗外来核酸入侵(如病毒)的一种反应,为植物抗病毒的遗传育种提供了具有实用价值的策略:RNA 介导的病毒抗性(RNA mediated virus resistance, RMVR)。
2010-04-18 RNAi(RNA interference)技术的研究进展与发展前景
(RNA interference,RNAi)是1998年由Fire等在线虫中发现的一种转录后的基因沉默 (Posttranscriptional gene silencing,PTGS)机制。双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)能特异地抑制或沉默目的基因表达,产生如同目的基因突变的缺陷表型,这种由dsRNA介导的基因阻抑作用被称为RNAi。

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