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2010-05-24 血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳
本实验利用聚烯酰胺凝胶作电泳支持物。电荷和分子大小不一的各种血清蛋白质通过浓缩效应、电荷效应、分子筛效应而被精细地分离。由于具有以上三种效应,所以此方法分离效果好,分辨率高。血清蛋白在醋酸纤维素薄膜电泳仅能分成5~7个组份,而在聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳中可分出12~30个组份。
2010-05-24 血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳
本实验利用聚烯酰胺凝胶作电泳支持物。电荷和分子大小不一的各种血清蛋白质通过浓缩效应、电荷效应、分子筛效应而被精细地分离。由于具有以上三种效应,所以此方法分离效果好,分辨率高。血清蛋白在醋酸纤维素薄膜电泳仅能分成5~7个组份,而在聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳中可分出12~30个组份。
2010-05-24 聚丙烯酰胺凝胶电泳原理特性和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳原理
聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(acrylamide,简称Acr)和交联剂又称为共聚体的N, N-甲叉双丙烯酰胺(methylene-bisacrylamide,简称Bis)在加速剂和催化剂的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶,以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳简称PAGE)。
2010-05-24 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度
由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制,因此可以形成“连续系统”和“不连续系统”两种电泳系统。“不连续系统”最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。电泳时,蛋白质样品放置在浓缩胶上,为防止蛋白质样品在电极缓冲液中扩散,因而加入等体积的40%蔗糖或50%甘油与之混合,以提高密度;为观察蛋白质样品泳动的情况,样品中还加入溴酚蓝等示踪染料,这些有色物质的分子比任何一种大分子物质泳动的速度都快,只要染料未泳动出凝胶管,样品就没有走出胶管的危险。
2010-04-29 蛋白表达的SDS-PAGE检测
握蛋白质电泳检测常用技术:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE),以及聚丙烯酰胺凝胶的考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue,R-250)染色技术。同时此实验还要学生掌握如何检测分析蛋白原核表达的状态,即判断蛋白原核表达部位:培养液(medium)、可溶性胞质部分(soluble fraction)、周质部分(periplasmic fraction)、包涵体部分(insoluble fraction)。
2010-04-20 蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳原理、仪器试剂和操作步骤
蛋白质在十二烷基硫酸钠(SDS)和巯基乙醇的作用下,分子中的二硫键还原,氢键等打开,形成按1.4gSDS/1g蛋白质比例的SDS-蛋白质多肽复合物,该复合物带负电,故可在聚丙烯酰胺凝胶电泳中向正极迁移,且主要由于凝胶的分子筛作用,迁移速率与蛋白质的分子量大小有关,因此可以浓缩和分离蛋白质多肽。
2010-04-10 SSR及PAGE电泳
所有真核生物基因组中都有一类叫微卫星(microsatellite)或简单序列重复(simple sequence repeats)的序列,它是由2-5个核苷酸首尾相连重复多次构成的一段DNA序列,具有很强的保守性。
2010-04-09 即时可用的蛋白质电泳标准
Choose a protein standard
2010-04-09 SDS-PAGE Gels(SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳)
Preparation of PAGE gels Reagents for SDS PAGE Rules of thumb Gel Composition Sample Buffers:
2010-04-09 聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE胶的配制
聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE胶的配制 各种浓度PAGE胶的配制(DNA电泳用)
2010-04-09 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验试剂和操作步骤
2010-04-09 Protein Electrophoresis
Protein Electrophoresis
2010-04-09 SDS-PAGE (PolyAcrylamide Gel Electrophoresis)聚丙烯酰胺凝胶电泳
SDS-PAGE (PolyAcrylamide Gel Electrophoresis)聚丙烯酰胺凝胶电泳
2010-04-09 聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamide gel)选择指导
Invitrogen提供了大量的涵盖面广的蛋白分离预制胶,包括不同的成分,百分比浓度和格式。使用合适的胶百分比浓度,缓冲系统,上样孔格式以及胶的厚度,对于获得最好的结果非常重要。以下提供了帮助你选择适合你应用的正确凝胶的信息。
2010-04-09 考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液常见问题
考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液常见问题
2010-04-09 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western转印的常见问题
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western转印的常见问题
2010-04-09 等电聚焦(Isoelectric focusing,IEF)电泳法测定蛋白质的等电点
等电聚焦(Isoelectric focusing,简称IEF)是六十年代中期出现的新技术。近年来等电聚焦技术有了新的进展,已迅速发展成为一门成熟的近代生化实验技术。目前等电聚焦技术已可以分辨等电点(pI)只差0.001pH单位的生物分子。由于其分辨力高,重复性好,样品容量大,操作简便迅速,在生物化学、分子生物学及临床医学研究中得到广泛的应用。
2010-04-09 等电聚焦凝胶电泳原理
等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术,等电聚焦中,蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸,在电场中形成正极为酸性,负极为碱性的连续的pH梯度。
2010-04-09 等电聚焦载体两性电解质(carrier ampholyte)的选择
等电聚焦载体两性电解质(carrier ampholyte)的选择
2010-04-09 固相pH梯度等电聚焦分析讨论
固相pH梯度的优缺点 pH范围的选择 蛋白质的可溶性和添加剂

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