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2010-04-29 动物细胞基因组DNA中小卫星多态性的Southern blot检测
Southern印迹杂交技术包括两个主要过程:一是将待检测的核酸分子通过一定的方法转移(电转印、虹吸转印、真空转印)并结合到一定的固相支持物(硝酸纤维素、尼龙膜)上,即印迹(blotting);二是固定于膜上的核酸与特定标记[放射性同位素、地高辛(DIG)、生物素(biotin)等]的核酸探针在一定温度和离子强度下复性(退火),即分子杂交。……
2010-03-30 分子杂交——Southern基因检测
Southern杂交是分子生物学的经典实验方法。其基本原理是将待检测的DNA样品固定在固相载体上,与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号。通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的长度。该项技术广泛被应用在遗传病检测、DNA指纹分析和PCR产物判断等研究中。……
2010-03-25 Southern Blot原理及操作方法
将待检测的DNA分子用/不用限制性内切酶消化后,通过琼脂糖凝胶电泳进行分离,继而将其变性并按其在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上,固定后再与同位素或其它标记物标记的DNA或RNA探针进行反应。……
2010-03-25 DNA印迹(Southern Blot)实验
DNA印迹技术主要用于对基因组DNA的定性和定量分析、克隆基因的酶切图谱分析、基因突变分析及限制性片段长度多态性(RFLP)等。Southern Blot仅仅是将待测DNA片段从电泳凝胶中转移并固定到固相支持物上,要实现DNA探测还需完成核酸杂交实验(包括探针标记、杂交和检测三个后续实验步骤)。……
2010-03-25 Southern Blot 实验流程(包括原理/细节)
一、DNA 的提取 二、引物设计 三、DNA 检测 四、探针制备(以PCR 标记方法为例) 五、基因组DNA 酶切 六、转膜 七、杂交 八、洗膜、信号检测(化学显色法) ……
2010-03-21 Southern 杂交技术
Southern技术是指以Southern名字命名的DNA转移杂交技术。它可用于基因组特定的DNA序列定位,可以测定相关片段的同源性、可以从c库、基因组文库中筛选完整基因等。……
2010-03-20 采用优化红球菌的地高辛标记探针的DNA印迹方案(Southern_blotting)
Southern blotting 采用优化红球菌的地高辛标记探针的DNA印迹方案……
2010-03-20 Southern blot实验方法和操作步骤
第一天 (restriction enzyme digestion) 第二天 (precipitation with ethanol) 第三天 (electrophoresis & transfer) 第四天 (pre-hybrid & hybridization) 第五天 (wash & detection)……
2010-03-20 Southern Blot实验原理及方法
Southern Blot是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量. ……
2010-03-15 Southern转膜方法(毛细管虹吸印迹法、电转移法与真空转移法)
1.毛细管虹吸印迹法 2.电转移法 3.真空转移法……
2010-03-09 Southern Blotting
Southern Blotting……
2010-03-08 Southern Hybridization Experiment Kit
This kit contains materials for six groups to perform Southern transfer and hybridization analysis using the included lambda DNA samples and biotinylated probe.……
2010-03-08 Southern Blot using Neutral Transfer
Southern Blot using Neutral Transfer……
2010-03-08 Southern Blotting(Fred Hutchinson Cancer Research Center)
Southern Blotting(Fred Hutchinson Cancer Research Center)……
2010-03-08 原位杂交(In Situ Hybridization,ISH)与荧光原位杂交(Fluorescenc...
一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 二、荧光原位杂交(Fluorescence in situ Hybridization) (一)固相膜核酸分子杂交方法 (二)固相核酸分子杂交类型 (三)液相核酸分子杂交类型 ……
2010-03-08 小麦Southern杂交分析方法
小麦Southern杂交分析方法……
2010-03-08 以酶联免疫反应与碱性去磷酸酶呈色反应侦测杂合讯息
进行杂合反应时所使用的探针若为放射性物质所标定者,杂合讯息可经由放射显影术 (autoradiography) 侦测出来;若为DIG所标定者,则需借助anti-DIG抗体与碱性去磷酸酶 (alkaline phosphatase, AP) 的conjugate,并利用碱性去磷酸酶的酵素活性转现杂合反应讯息。……
2010-03-08 Southern 转印分析
在胶体中的DNA 可利用毛细现象的作用将DNA 牵引转印至覆盖在胶片上的滤膜,经烘烤或UV 照射后,可使DNA 固定在膜上,以进行探针的杂合(hybridization) 反应。……
2010-03-08 物理显影液的配制
(一)硝酸银显影液 (二)乳酸银显影液 (三)醋酸银显影液 (四)彩色显影剂的配制 (五)漂白液的配制 (六)定影液的配制 (七)缓冲液……
2010-03-08 SOUTHERN BLOT的步骤
SOUTHERN BLOT的步骤……

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