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2010-07-19 噬菌体对宿主菌的作用
当噬菌体吸附到宿主菌特异的受点时,噬菌体尾部丝散开,固着于特异的受点,随之刺突和基板固定在受体上。有的噬菌体为丝状噬菌体,只吸附在性纤毛上。二价和一价离子可以促进噬菌体的吸附,如T1在0.001mol Ca2+、Mg2+、Ba2+或0.01mol Na+、K+、Li+时吸附最适。三价阳离子可以引起失活。
2010-07-19 噬菌体的化学组成和理化特性
噬菌体元素组成主要包括碳、氢、氧、氮、硫等。WH分析表明,碳为42%,氮13.2%,氢6.4%,磷3.7%。这些元素组成的核酸和蛋白质,占噬菌体重量的90%以上。核酸组成噬菌体的髓核,是遗传信息的载体,蛋白质组成噬菌体的衣壳,具有保护作用。核酸和蛋白质约各占一半,随种类的不同而变化。
2010-07-19 噬菌体的形态与结构
噬菌体不能在光学显微镜下观察到,因此,对噬菌体形态、结构的认识,得从电子显微镜开始,这一点与细菌素是相同的。噬菌体个体叫做病毒粒子,它的形状有3种,包括蝌蚪形、微球形和纤丝形。
2010-07-19 噬菌蛭弧菌、噬菌体和细菌素
在流行病学和细菌学的研究中,噬菌蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus,简称蛭弧菌)、噬菌体、细菌素的研究及其应用已越来越引起人们的关注。蛭弧菌、噬菌体、细菌素是分属于细菌、病毒、抗菌物质3种不同的有机物,但它们有许多相似的生物特性,而且往往引起人们产生错误的概念。
2010-07-19 细菌和噬菌体的遗传分析
遗传重组是生命的重要现象之一,在生物进化过程中起着极其重要的作用。从低等的原核生物到高等的哺乳动物其重组方式是多种多样的。真核生物中的遗传重组,主要是通过染色体上的基因自由组合或交换实现的,是生物有性生殖过程的一部分,形成的二倍性合子的遗传组分,一半来自父体,一半来自母体,基因的自由结合和交换是在两个交配亲体的整套染色体基因组间进行的。
2010-07-19 噬菌体侵染细菌的实验
噬菌体是寄生在细菌细胞中的病毒.一个典型的噬菌体的生活周期,可以分为3个阶段感染阶段,增殖阶段和成熟阶段.有关的主要内容在课本上已经介绍过了,这里再稍加详述如下.
2010-07-18 噬菌体展示技术
该技术的主要特点是将特定分子的基因型和表型统一在同一病毒颗粒内,即在噬菌体表面展示特定蛋白质,而在噬菌体核心DNA中则含有该蛋白的结构基因。另外,这项技术把基因表达产物与亲和筛选结合起来,可以利用适当的靶蛋白将目的蛋白或多肽挑选出来。近年来,随着噬菌体展示技术的日益完善,该技术在众多基础和应用研究领域产生的影响已日渐明显
2010-07-18 烈性噬菌体(virulent phage)和温和噬菌体(temperate phage)
噬菌体(bacteriaphage or phage)是病毒的一类,结构很简单,基本上由一个蛋白质外壳包裹着一些核酸组成的。噬菌体的多样性来自于组成其外壳的蛋白质的种类,以及其染色体的类型和结构的不同。
2010-07-11 碘化物缓冲液提取噬菌体单链DNA
碘化物缓冲液: 10 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM EDTA, 4 M NaCl。室温避光贮存。不知道这里面哪个是需要避光的?我怎么没有提出DNA来,不知道是为什么?用的是NEB手册上写的方法。
2010-07-11 pfu及噬菌体滴度测定方法
只有当噬菌体的感染复度MOI (multiplicity of infection)值远低于1时(即细胞过量时),噬菌斑的数量才会随着加入噬菌体的量而呈线性增加。正因如此,建议检测噬菌体贮液的滴度时,在感染前进行稀释,而不是在高MOI值的情况下稀释被感染的细胞。低MOI值有助于确保每个噬菌斑仅含一个DNA序列。
2010-07-10 噬菌体展示技术
近几年来,噬菌体展示技术成为探测蛋白空间结构、探索受体与配体之间相互作用结合位点、寻找高亲和力和生物活性的配体分子的有利工具,在蛋白分子相互识别的研究、新型疫苗的研制以及肿瘤治疗等研究领域产生了深远的影响。肽库(peptide library)的应用为确定表位序列以至其构象提供了另一有力工具。
2010-07-10 噬菌体MOI(multiplicity of infection)值及其意义
MOI 是multiplicity of infection的缩写,中文译为感染复数。传统的MOI概念起源于噬菌体感染细菌的研究。其含义是感染时噬菌体与细菌的数量比值,也就是平均每个细菌感染噬菌体的数量。噬菌体的数量单位为pfu。一般认为MOI是一个比值,没有单位,其实其隐含的单位是pfu number/cell。后来MOI被普遍用于病毒感染细胞的研究中,含义是感染时病毒与细胞数量的比值。
2010-07-10 λ噬菌体DNA提取试剂制备、操作步骤和注意事项
经过改造的λ噬菌体克隆位点可插入几到几十kb的外源DNA。许多cDNA和基因组文库是以λ噬菌体作为克隆载体构建的。因此,在经文库筛选得到目的克隆后,我们常常需要利用λ噬菌体裂解生长的特点,培养获得大量的噬菌体颗粒,并提取λ噬菌体DNA来开展进一步的工作。
2010-07-10 噬菌体扩增和测滴度方法
17:00:后用接种环取一单克隆细菌接种于LB培养液中,37°C摇床过夜(不要超过16小时)
2010-07-10 噬菌体的鉴定方法和步骤
1 样品采集 2 增殖培养 3 离心分离 4 生物测定法
2010-07-10 噬菌体的分离和鉴定
1、噬菌体分离 2、噬菌体的分离和鉴定 3、噬菌体的分离 4、大连近海河流弧菌Ⅱ噬菌体的分离与研究
2010-07-10 Cre-loxP系统
本文介绍的是Cre-loxP系统。loxP发现于P1噬菌体,loxP规定了P1基因图谱终点的位置,在loxP位点上的重组仅由一个噬菌体编码蛋白 -Cre介导。Cre-loxP系统是一种效果很好的位点特异性的重组系统。
2010-07-10 M13噬菌体载体的宿主菌(分子克隆实验指南)
本文介绍M13载体及其重组体增值常用的大肠杆菌菌株以及如何选择使用M13噬菌体载体。
2010-07-09 M13噬菌体的培养(分子克隆实验指南)
本文详细说明了M13噬菌体的平板培养和液体培养步骤。
2010-07-09 M13噬菌体DNA的制备(分子克隆实验指南)
本文介绍了M13噬菌体双链(复制型)DNA和单链DNA的制备方法。感染M13噬菌体的细菌含病毒双链RF DNA,培养基中粗提病毒颗粒中含单链子代DNA。双链RF DNA可以采用类似于质粒纯化的方法从感染细胞的小量培养物中分离,而M13噬菌体单链DNA的制备首先在高盐存在下,丝状病毒被聚乙二醇沉淀浓缩,然后用酚抽提释放单链DNA,最后乙醇沉淀收集单链DNA。

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