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2010-04-24 cDNA合成技术
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2010-04-24 96-well RNA In Situ Hybridization Protocol
96-well RNA In Situ Hybridization Protocol……
2010-04-24 ESTs from Phage Plaques
ESTs from Phage Plaques……
2010-04-24 cDNA Synthesis from MOLT-4 Cells
cDNA Synthesis from MOLT-4 Cells……
2010-04-24 Protocol for First-strand cDNA Synthesis
Protocol for First-strand cDNA Synthesis……
2010-04-21 cDNA的制备与检测
总RNA,经寡聚(dT)纤维素亲和层析柱分离出mRNA,以寡聚(d丁)为引物,经反转录合成双链cDNA。先用反转录酶合成第一条cDNA链;经碱降解作用除去RNA模板后用大肠杆菌DNA聚合酶,以第一条链cDNA的3’末端结构为引物合成第二链,最后形成双链cDNA。……
2010-04-19 Rapid Amplification of mRNA Ends By PCR (RACE)
Rapid Amplification of mRNA Ends By PCR (RACE)……
2010-04-19 cDNA的合成实验原理和操作步骤
反转录酶主要用于体外cDNA的合成。目前最常用的反转录酶(reverse transcriptase) 有SuperscriptII、M-MLV和AMV等。它们具有依赖于RNA或DNA的DNA聚合酶活性和RNaseH酶活性,可以以RNA分子为模板,合成出一条DNA链。形成的DNA是与RNA模板互补的,因而反转录产生的DNA分子称之为cDNA。……
2010-04-19 cDNA Production
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2010-04-19 cDNA文库的构建
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2010-04-19 构建cDNA文库研究进展
自20世纪70年代中期首例 cDNA 克隆问世以来,构建 cDNA 文库已成为研究功能基因组学的基本手段之一。cDNA 便于克隆和大量表达,它不像基因组含有内含子而难于表达,因此可以从 cDNA 文库中筛选到所需的目的基因,并直接用于该目的基因的表达……
2010-04-19 差减cDNA文库法
[第一条链cDNA合成] [第二条cDNA链的合成] [填补cDNA末端] [cDNA末端磷酸化] [限制性内切酶消化]以得到粘性末端 [cDNA大小的选择] [包装]试剂由Strategene制备 [制备ZAPⅡ文库的单链cDNA] [大量制备生产单链噬菌体DNA] [生物素标记] [差减杂交]……
2010-04-19 cDNA的筛选
(一)λgt11 cDNA文库铺平板 (二)杂交筛选——cDNA序列作为探针 (三)免疫筛选 (四)噬菌体颗粒纯化,DNA分离和亚克隆……
2010-04-19 cDNA文库综合分析体系的建立
实验室的需求 ·生物学实验室研究产生大量的EST/cDNA序列,如何分析数据成为现实问题。应用人工上网用blast比对分析1000个EST,约需2个月的工作量,且结果单一,数据不可靠。 ·分析体系处理仅需1-2个小时,并且可以……
2010-04-19 基因组文库和cDNA文库的构建及筛选 (Construction and Screening ...
基因组文库和cDNA文库的构建及筛选 (Construction and Screening of Genomic and cDNA library) 基因组文库是含有某种生物体全部基因的随机片段的重组DNA克隆群体;cDNA文库是指含有所有重组cDNA的克隆群体。……
2010-04-19 功能基因cDNA 5’末端的克隆
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2010-04-19 RACE(rapid-amplification of cDNA ends)技术
RACE技术的简介;RACE的优点;实验室现有的RACE试剂盒的简介;RACE引物的设计;反应中涉及到的一些事项;具体的实验步骤;接头的连接及连接产物的稀释;RACE-PCR扩增;RACE产物的验证;比较由GSP和NGSP获得RACE产物;RACE产物的克隆和测序;全长cDNA 的获得;Appendix:cDNA接头和引物……
2010-04-19 cDNA文库组标准流程
一.Total RNA的提取 二.mRNA的分离 三.cDNA双链合成 四.载体制备 五.cDNA 双链和载体的连接 六.电转化流程 七.快速鉴定、菌落PCR 八.pBlueScript cDNA库扩增……
2010-04-19 Northern Blot
Northern Blot……
2010-04-19 功能基因 cDNA 3’末端的克隆原理、材料和方法
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