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2010-05-25 细胞凋亡检测(Annexin-V-FITC 单染法)(Assay of Cell Apoptosis)
细胞凋亡或称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death ,PCD)是细胞的生命现象之一,它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋亡过度有关,自身免疫性疾病和肿瘤与细胞凋亡的抑制有关。细胞凋亡有别于细胞坏死,它有一系列的细胞形态学和生物化学的改变,包括出现染色质浓缩、DNA降解、凋亡小体形成等。
2010-05-25 T 淋巴细胞转化试验(T Lymphocyte Transformation Test)
T细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化。淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一。
2010-05-16 淋巴细胞转化实验(Lymphocyte transformation test-LTT)
T淋巴细胞表面具有植物血凝素(PHA)和刀豆蛋白(ConA)等非特异性有丝分裂原受体,在体内或体外遇到有丝分裂原刺激后,可转化为淋巴母细胞,依其细胞转化程度可测定T细胞的应答功能,称为淋巴细胞转化试验。
2010-05-14 细胞凋亡(apoptosis)的检测
细胞凋亡(apoptosis)是一种由基因控制的细胞自主性死亡方式。其发生诱因及形态学特征均有别于坏死,与人类免疫系统的发生发展、神经组织发育、器官的形成、肿瘤的发生发展等诸多生物学现象之间有着密切联系,并且是免疫应答过程中免疫细胞的杀伤机制之一。细胞凋亡的检测技术已成为免疫学检测的一个重要内容。凋亡细胞具有典型的形态学、生物化学及分子生物学变化,从这些特点出发发展起来的检测方法有形态学鉴定、电泳法、免疫学方法、流式细胞术、原位末端转移酶标记技术、靶细胞DNA片段的定量等。
2010-03-28 光学显微镜的使用、植物细胞有丝分裂的制片和观察
有丝分裂是植物细胞分裂的主要方式,细胞分裂过程中,核内染色体准确地复制,并有规律地、均匀地分配到两个子细胞中去,使子细胞和母细胞的遗传组成一样,保证了植物细胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中,如根尖组织、茎尖组织、居间分生组织、愈伤组织等,常进行着剧烈的细胞有丝分裂。
2010-03-28 动物细胞融合(animal cell fusion)
动物细胞融合(animal cell fusion)
2010-03-27 细胞凋亡的分子生物学检测方法
细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程,染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ²+和Mg²+依赖的核酸内切酶作用下,在核小体单位之间被随机切断,形成180~200bp核小体DNA多聚体。
2010-03-21 细胞凋亡(Apoptosis)实验
细胞凋亡(Apoptosis) 又称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death,PCD)是指细胞基因调控的一种自主性的自杀现象。目前凋亡细胞的检测方法主要有:1、形态学观察,细胞凋亡时有其典型的形态学改变,例如体积缩小变圆,胞浆浓缩,核固缩边集在核膜下呈月牙状或腰带状,胞膜芽生,凋亡小体形成;2、流式细胞仪检测
2010-03-20 MTT实验问题汇总
2010-03-20 细胞凋亡小体和梯状DNA的观察
细胞死亡作为生物体的一种常见现象,一般可分为两种类型:细胞坏死(necrosis)和细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)。后者也称细胞凋亡(apoptosis)。细胞坏死是细胞在遭受极度刺激时引起的细胞死亡,以细胞质膜的破裂为特征,造成内含物的炎性泄露,是一种非正常死亡。细胞凋亡是细胞的一种“主动性”死亡行为,由基因控制,表现为细胞染色质凝集并边缘化、细胞浓缩、凋亡小体产生及DNA片段化等。由于片段化而形成的DNA Ladder被认为是细胞凋亡的典型特征。
2010-03-18 IL-2生物学活性检测(MTT)原理材料和方法
2010-03-18 LAK/TIL细胞的制备与活性测定
(一)主要试剂材料 (二)外周血单个核细胞( PBMC )的制备及其LAK细胞的诱导 (三)脾细胞的制备及其LAK细胞的体外诱导 (四)TIL细胞的分离制备及其诱导 (五)LAK细胞和TIL活性的测定
2010-03-18 淋巴细胞转化试验(MTT)原理=材料和方法
四甲基偶氯唑盐(MTT)可作为线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成紫兰色的甲臢,将结晶的甲臢溶解释放后,可根据所测的OD值反映活细胞的数量和活性,从而推知待测样品的水平。
2010-03-18 四唑盐(MTT)比色试验
MTT原理是MTT可作为哺乳类动物细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成紫蓝色的晶状甲瓒(Formazan),将结晶的甲瓒溶解释放,再用酶联免疫检测仪测定吸光度OD值,OD值的高低可间接反映活细胞的数量及其活性
2010-03-18 MTT实验原理和实验步骤
MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,是一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT,同时在细胞色素C的作用下,生成蓝色(或蓝紫色)不溶于水的甲臜(Formazan),甲臜的多少可以用酶标仪在570nm 处进行测定。
2010-03-17 L929细胞增殖MTT比色法检测IL-1的生物活性实验原理和操作步骤
IL-1具有刺激多种来源的成纤维细胞增殖的作用,可用于IL-1生物活性检测。目前国内外大多数实验室常用L929细胞株(小鼠成纤维细胞瘤细胞)作为检测IL-1生物活性的靶细胞或反应细胞。
2010-03-07 荧光染色观察药物诱导细胞凋亡
荧光染色观察药物诱导细胞凋亡
2010-03-07 药物诱导细胞凋亡时bcl-2表达变化
逆转录-聚合酶链反应(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction,RT-PCR)的原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。
2010-03-07 药物诱导细胞凋亡时Bcl-2蛋白含量的变化
Western印迹法,把聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的组分从凝胶转移至一种固定支持体,以针对特定氨基酸序列的特异性试剂作为探针检测之。
2010-03-07 RD-PCR观察长春新碱诱导肿瘤细胞凋亡时基因表达的变化
限制性显示PCR技术(RestrictionDisplayPCR,RD-PCR)技术的思路是在获得反转录的cDNA之后,进行Sau3AI酶切。

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